使用離心濃縮管進行緩沖液交換或樣品濃縮時需要對方案進行優(yōu)化,并正確操作設(shè)備及配套移液器,以確保避免污染的情況下,獲得準(zhǔn)確的產(chǎn)量測量值并在長濃縮管中回收全部體積的樣品
為確保達得到良好的實驗結(jié)果
可按照如下5個步驟進行操作
1、使用手動移液模式測定產(chǎn)量
電動移液器的手動移液模式方便用戶通過調(diào)節(jié)輪來控制吸液和排液,從而確定未知樣品的體積。
2、選擇合適的移液器吸頭
在避免污染的同時吸取長管內(nèi)的液體可能挑戰(zhàn)性。因此,使用正確類型的移液器吸頭以及帶角形死端收集器的濃縮管可確保盡可能回收濃縮液。建議使用加長型移液器吸頭,因為其長度可確保移液器無需被伸入濃縮管。同時,使用低吸附吸頭有助于zui大限度回收表面張力低的液體樣品。
3、調(diào)整移液速度
通過將移液器的速度設(shè)置調(diào)整為慢速,可以防止形成泡沫和氣泡。
4、進行離心濃縮
準(zhǔn)備Vivaspin® 濃縮管,完成膜清洗和超濾管鈍化后,使用離心機進行濃縮。濃縮時間由所需的濃縮系數(shù)及相對離心力(RCF)而定。
5、測定容積得率
將Picus® 移液器設(shè)置為手動模式,將吸液速度設(shè)置為3,排液速度設(shè)置為3。吸入時,確保將吸頭置于液體表面之下,同時要避免吸頭太靠近底部。將所有液體吸入吸頭后立即松開調(diào)節(jié)輪,觀察容器底部是否有殘余液體聚集,再讀取移液器顯示屏上的總吸入量。zui后將排空。