研究以天麻素和對(duì)羥基苯甲醇的總提取量為指標(biāo),分析多變量之間的交互作用,優(yōu)化天麻中活性成分的超高壓提取工藝。
1.儀器
Agilent1120高效液相色譜儀(包括二極管陣列檢測(cè)器、二元泵、自動(dòng)進(jìn)樣器,美國(guó)安捷倫科技有限公司);HPP.L3-600型超高壓提取設(shè)備(天津市華泰森淼生物工程技術(shù)有限公司);Sartorius BSA124S型電子天平(賽多利斯科學(xué)儀器(北京)有限公司);BU-CHI旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(瑞士步琦有限公司)。
2.對(duì)照品溶液的制備
用賽多利斯電子天平精密稱取天麻素和對(duì)羥基苯甲醇對(duì)照品各10mg,分別置于100mL容量瓶中,加入90%的乙腈水溶液溶解,并定容至刻度,搖勻,配成濃度為100μg·mL-1的對(duì)照品溶液,4℃保存。
3.供試品溶液的制備
天麻藥材經(jīng)干燥后,粉碎,過60目篩,用賽多利斯電子天平精密稱取本品粉末1.00g,按預(yù)先設(shè)定的參數(shù)進(jìn)行超高壓提取。提取液經(jīng)3800r/min離心7min后,取上清液,減壓濃縮至約10mL,定容至10mL,得天麻供試品溶液。
4.結(jié)論
本研究采用單因素實(shí)驗(yàn)考察了乙醇濃度、料液比、提取壓力和保壓時(shí)間對(duì)天麻超高壓提取的影響,之后采用Box-Behnken中心組合試驗(yàn)研究幾種因素間的交互作用。根據(jù)分析結(jié)果,乙醇濃度、料液比、提取壓力和保壓時(shí)間對(duì)天麻中指標(biāo)性成分的總提取量具有極顯著影響;料液比和提取壓力的交互作用對(duì)總提取量具有極顯著影響;乙醇濃度和提取壓力的交互作用對(duì)總提取量的影響顯著。結(jié)合實(shí)際應(yīng)用,終確定天麻的超高壓提取工藝為乙醇濃度82%、料液比1:40,提取壓力500MPa、保壓時(shí)間4min。應(yīng)用超高壓技術(shù)提取天麻中有效成分具有高效、簡(jiǎn)便,耗能少的優(yōu)點(diǎn),可用于天麻及其制劑的質(zhì)量控制過程中活性成分的提取。